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| 穿心莲内酯对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响 |
糖尿病肾病(DN)是导致终末期肾病的首要因
素，而氧化应激反应在DN的发生和发展中起重要
的作用。高糖可促进线粒体电子传递链生成的活性
氧(ROS)增加自由基的生成，还可损伤机体的抗氧
化系统。有资料证实穿心莲内酯(AP)对糖尿病的
血糖有一定改善作用H J。但有关AP对糖尿病的并
发症的研究相对较少，2010年2～5月，本研究通过
观察AP对糖尿病大鼠肾脏的氧化应激方面的影响
来探讨其对肾脏的保护作用。
1 材料与方法
1．1 实验动物60只雄性清洁级SD大鼠，体质量
(200±20)g。随机分为对照组8只、糖尿病造模组
52只。
1．2 主要试剂及仪器穿心莲内酯；高
脂高糖饲料：由脂肪15％ 、蔗糖20％ 、鸡蛋8％ 、胆
固醇1％ 、食盐0．5％ 、胆盐2％ 和常规饲料53．5％
混合；链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司)；盐酸二
甲双胍(北京京丰制药有限公司产品)；过氧化氢酶
(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．PX)活性测定试剂盒，
均购自南京建成生物工程研究所。URIT．21血糖分
析仪(桂林优利特医疗电子有限公司)；722分光光
度仪(上海精密科学仪器有限公司)；ES一180J电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)。
1．3 方法
1．3．1 实验动物模型制备与分组按参考文献方
法 稍加改进建立模型。大鼠适应性喂养1周后，
测血糖、尿蛋白各组间无差异。造模组给予高脂高
糖饲料喂养，第4周造模组体质量达到(260±30)g
后，采用两次性腹腔注射STZ(30 mg／kg)方法诱导
糖尿病大鼠模型。造模前禁食12 h，以0．1 mol／L、
pH 4．2的柠檬酸盐缓冲液溶解STZ配制成1％ STZ
溶液使用。对照组按体质量注射相应量的缓冲液。
注射4 h后，每只大鼠按10 mg／kg腹腔注射50％ 的
葡萄糖溶液。7 d后行第2次造模。第2次注射后
3 d断尾取血测空腹血糖，空腹血糖>16．8 mol／L
的大鼠，确定为糖尿病模型，共成模35只。按血糖
分层随机分组，分为糖尿病组11只、二甲双胍组(M
组)、AP小剂量组(LA组)、AP大剂量组(HA组)各
8只。用药方案：第6周开始，均按10 mg／kg强制性
灌胃，每日中午1次。对照组、糖尿病组为蒸馏水；
M组为2．5％二甲双胍；LA组为0．5％AP；HA组为
1％AP。所有大鼠在之后的实验期间喂标准饮食、
自由觅水，不应用胰岛素。
1．3．2 指标检测用电化学法血糖仪进行血糖检
测。第14周处死前1周所有大鼠用金属代谢笼留
取24 h尿，测尿量及留取尿标本一20℃保存，1周
内测量。大鼠处死前先禁食12 h后，称重、量体长、
以40 mg／kg的1％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，麻醉后大鼠心脏采血，取全血测空腹血糖，抗凝血测血肌
酐、血尿素氮。迅速灌洗留取双侧肾脏，用电子天平
称重后取0．2 g左右的肾组织，用生理盐水和均质
器制成10％ 的组织组织匀浆，一80℃ 保存待测
SOD、MDA、GSH—PX、CAT、组织匀浆蛋白含量。
1．3．3 统计学方法采用SPSS 13．0统计软件，实
验数据采用 ±S表示，使用one．way ANOVA中的
LSD和Games．howell法比较多组计量资料组间差异
性，以P≤0．05为差异有统计学意义。
2 结果
2．1 各组大鼠一般情况 正常对照组大鼠精神状
态良好，无死亡。糖尿病造模成功后的大鼠均出现
多饮、多尿、多食，消瘦及生长行动迟缓等症状。其
中糖尿病组有3只死亡，M组有1只死亡。其中糖
尿病组考虑死因为血糖过高引起酮症酸中毒或感
染，M组考虑过度消瘦。至实验结束时，M、HA组大
鼠一般情况有所改善。
2．2 各组大鼠血糖、体质量、肾功能指标结果见
表1。
3 讨论
DN是严重影响患者生活质量和威胁患者生命
的糖尿病慢性并发症，是2型糖尿病患者的首位死
因。其可导致肾功能受损，肌酐清除率下降，血肌
酐、尿素氮增加，最后导致尿毒症的出现。有研究表
明改善氧化应激水平和抗氧化系统，可以减轻糖尿
病所引起的肾损害 J。机体内存在两类自由基防
御系统，一类是酶促防御系统包括：SOD、CAT、GSH．
PX等，另一类是非酶促防御系统：包括维生素C、谷
胱甘肽等。正常情况下，自由基的产生和清除保持
平衡，但在糖尿病情况下，体内自由基大大增加，同
时机体抗氧化防御能力下降，氧化能力大大超过抗
氧化能力而发生氧化应激，从而直接引起生物膜脂
质过氧化、细胞内蛋白及酶变性最后导致细胞死亡
或凋亡、组织损伤和疾病发生。MDA是脂质过氧化
的终产物，SOD、CAT和GSH．PX是抗氧化酶的主要
指标，他们是目前公认的反应氧化应激水平的指标。
本实验采用两次小剂量注射STZ的方法建立糖尿病大鼠模型，且糖尿病组一般情况、血糖、血肌酐、
肌酐清除率、尿蛋白等指标均较对照组组有显著性改
变，这说明造模成功。经过8周给药的研究发现，穿心莲内酯
能改善糖尿病大鼠的一般情况、血糖水平、肾功能相
关指标，并提高造模组较低的肾组织GSH—PX活性，
同时也能降低氧化应激水平，使糖尿病造模组升高的
肾脏的SOD、CAT的水平有所降低和降低肾脏的
MDA含量。这提示穿心莲内酯对糖尿病大鼠肾脏具有较好的
保护作用，这可能与其提高GSH—PX抗氧化酶的活性
有关，但发挥这些生物学效应的机制尚需进一步研究。
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