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| 优化超声提取酶解得到黄芩素的方法 |
黄芩为唇形科植物黄芩(Scutellaria Baicalensis
Georgi)的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎
之功效。黄芩中含有黄芩苷、黄芩素等有效成分，其中
黄芩苷是主要成分，黄芩素为黄芩苷的苷元。文献报道，
黄芩苷为复原型前体药物，即黄芩苷口服后可以在肠内
经细菌作用转化为黄芩素后被吸收，再在体内结合形成
黄芩苷【2】。有关黄芩苷和黄芩素的胃肠吸收动力学研究
也表明，口服黄芩苷生物利用度较低，口服黄芩素的达
峰浓度以及生物利用度均高于黄芩苷[31。
黄芩中自身存在一种酶可以将黄芩苷酶解为黄芩
素，这种酶是 一葡萄糖醛酸酶，可考虑用这种酶将黄
芩苷转化为黄芩素用于口服制剂中[4_。1。目前，酶解后得
到黄芩素多采用浸渍法、酶解醇提法提取[6- 】；但这两种
提取方法费时，且工序复杂。本研究采用酶解后超声提
取黄芩素的方法，并对主要影响因素进行考察，优化了
提取方法。
1仪器与试药
1．1 主要仪器高效液相色谱仪(日本JASCO)：uV_
l 575检测器，PU一1 580色谱泵，Z W 温度控制器，
CKChrom色谱工作站；Discovery C R(250rnm×4．6
mm，5 m)色谱柱；KQ100E、KQ300、KQ500B超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；TG16一WS台式高速
离心机，长沙湘仪离心机仪器有限公司；YP1200电子
秤，上海精科天平公司；AG一245电子分析天平，瑞士梅
特勒一托利多公司；惠普-8453紫外可见分光光度计。
1．2 试药 黄芩的干燥根，购于中国药业集团承德有
限责任公司，并经承德医学院赵春颖副研究员鉴定为统
芩，产于河北承德，为热河黄芩；黄芩素对照品，批号：
l11595-200604，购于中国药品生物制品检定所；黄芩苷
对照品，批号：715-20011l，购于中国药品生物制品检定
所；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 黄芩素的分析方法
2．1．1 色谱条 】：Discovery C． (250mm×4．6mm，
5 m)色谱柱；流动相：甲醇一水一冰醋酸(48：52：0．4)；
柱温：35℃；流速：0．8ml／min；检测波长：275nm。
2．1．2 标准曲线的制备：精密称取黄芩素对照品5．23mg，
置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即
为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液3．0，6．0，9．0，
12．0，15．0 1注入液相色谱仪，以峰面积(Y)对进样量
(X)进行线性回归，回归方程为Y-4000000X-484769，
r=0．9995，线性范围：0．6276-3．138 IIg。
2．1．3 精密度实验：分别取黄芩素对照品溶液l0“l
连续进样6次，记录色谱峰面积，黄芩素峰面积的RSD
为1．93％。
2．1．4 供试品溶液制备：分别称取酶解后的黄芩药材
600mg、黄芩素提取物250mg，]J1170％乙醇超声溶解，定
容至100ml；精密量取10ml续滤液于100ml容量瓶中，用
70％乙醇定容，即得。
2．1。5 样品测定方法：精密吸取供试品溶液各5 l，进
样，测定峰面积，随行标准品，按照标准品计算黄芩素的
含量。
2．2 黄芩素提取物的制备取160．0g黄芩药材粉碎
过l号筛，1J16倍量水搅匀，60~C下保温10h(酶解)，取出，
滤过后将药材于70~C烘干(酶解后的黄芩药材)，再经超
声提取、干燥，即为黄芩素提取物。
选择4个对实验影响最大的因素进行正交实验。分
别称取酶解后的黄芩药材9份，每份5． ，用l0倍量乙醇
作为提取液 ；选取超声功率、乙醇浓度、提取时间、提取
次数4个因素进行进行考察，按照L。(3 )表进行正交实
验，因素和水平见表l。以从酶解后黄芩药材中提取到的
黄芩素的量为指标，正交实验结果见表2，方差分析结果
见表3。结果表明，因素C、D即乙醇的浓度和提取次数对
从酶解后黄芩药材中提取到的黄芩素的量有非常显著
的影响，提取时间和超声波功率对提取黄芩素的量有一
定影响。70％乙醇和95％乙醇所得黄芩素含量接近，从成
本等因素考虑，优选出提取工艺为A，B，C D，，即超声功
率300w，超声时间20分钟，超声次数4次，乙醇浓度7O％。
2．3 工艺验证试验取黄芩药材，粉碎过l号筛，称取
l0．0g，加入105．3ml水，将容器密闭，60~C下酶解10h，向
酶解好的药材中加入95％乙醇294．7ml，配成相当于70％
的乙醇溶液。用纱布过滤，滤液分成4份，按2．2确定的工
艺进行提取。几份样品提取后经测定并取平均值：干燥
物中黄芩素的含量为5O．83％，转移率为70．43％。
2．4 工艺放大试验取黄芩药材，粉碎过1号筛，称取
1000．0g，加入10530ml水，将容器密闭，60~C下酶解10h，
向酶解好的药材中加入95％乙醇29470ml，配成相当于
70％的乙醇溶液。将提取液旋转蒸发，所得浸膏静置、抽
滤，将滤饼干燥，得158．9g。照2．1黄芩素的分析方法制
备黄芩素供试品溶液并进行测定，干燥物中黄芩素的含
量为54．O7％，转移率为89．77％。
3讨论
正交实验结果表明，超声功率对实验结果影响不
大，乙醇浓度对黄芩素提取率有显著影响，但从降低成
本的角度考虑，选择了次佳水平，1~p70％的乙醇。经工艺
放大试验证实该法方便有效，提取物含量达50％以上。
在进行正交实验时，酶解黄芩粉末后过滤，滤液中
含有黄芩素，有文献报道不足2％，虽然可以除去水溶性
杂质，但在大量生产时这种损失比较大，在对黄芩素的
优化提取过程中，没有将其过滤，而采用过量的水溶解，
再加入95％乙醇，配成相当于70％的乙醇溶液，这样即可
以使黄芩苷酶解完全，又避免了黄芩素的损失，在提取
到黄芩素的浸膏后，用水进行精制，这一步可以很好的
除去水溶性杂质，避免了多次损失浪费。
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