1 仪器与试药Waters HPLC515型，Waters 2487 紫外检测器，Waters 7725i 进样阀， Millennium32色谱管理工作站；日本岛津UV一2001 可见紫外分光光度计。生黄芩与酒黄芩(南京市医药公 司提供，经南京中医药大学鉴定教研室鉴定为唇形科 植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根)。黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所)。甲醇、乙醇、 磷酸均为分析纯，水为重蒸馏水。该实验在南京中医药 大学实验室进行。

 2 方法与结果

 2．1 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品加甲 醇制成每lml含0．45mg的溶液。

 2．2 供试品溶液的制备取生黄芩与酒黄芩各 2份，约7．8g精密称定，分别用热水和冷水投料，煎煮 3次，每次1．5h，过滤，合并滤液，定容至500ml。精密 吸取滤液6ml，精密加70 乙醇[3 100ml称定重量，超 声处理0．5h，放冷，称定重量，用70 乙醇补充丢失的 量，滤过，精密吸取滤液5ml，用70 乙醇定容至 10ml，即得生黄芩热水投料、冷水投料，酒黄芩热水投 料、冷水投料的供试品溶液。

 2．3 色谱条件 Waters Resolve silica C】8柱(3． 9ram×150mm，5／~m)，流动相甲醇一0．4 磷酸水溶液 (40：60)，流速1．0ml／min～，检测波长为280nm，柱温 27C，理论板数按黄芩苷峰计算为4500。

 2．4 标准曲线制备精密吸取对照品溶液0．2、 0．4、0．6、0．8、1．0ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀 释至刻度，分别吸取上述溶液10F1注入高效液相色谱 仪，按上述条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，黄芩苷量(ng)为横坐标，绘制标准曲线，计算黄芩苷量对 峰面积的回归方程为C一7．5382+0．000290 44A，r一 0．9998，线性范围90．0~450ng。

 2．5 精密度试验精密吸取对照品溶液(45Fg ·ml )6 l，重复进样5次，测定黄芩苷峰面积平均值 890342，RSD一0．15O％ 。

 2．6 重现性考察取同批酒黄芩煎液5份按供试品溶液制备方法制备，测定百分含量结果，平均值为 6．824 ，RSD一0．210 。

 2．7 供试品溶液稳定性考察 取同批酒黄芩供 试品溶液，在室温下自然放置，间隔一定时间(0、4、8、 12、24、48h)测定峰面积平均值536898，RSD一0． 650 ，可见供试品溶液中黄芩苷的含量至少在48h 内稳定性良好。

 2．8 样品测定精密吸取对照品溶液(45Fg· ml。)6 l，供试品溶液1O l依上述色谱条件测定，供试 品中黄芩苷的含量测定结果见附表。

 3 讨论黄芩苷含量测定作为以黄芩为主药 的制剂的质量指标越来越重要，特别在制备工艺的研 究中，人们往往考虑到黄芩苷易被酶解的这一特性，在 提取工艺中不同商品黄芩，甚至对于已在炮制过程中 除去大部分酶的商品黄芩，如酒黄芩，均采用热水投料 煎煮的方法，导致其他杂质轻易混入提取液中，造成提 取工艺复杂化。本文对酒黄芩不同投料方法煎出液中 有效成分检测研究表明，其主要有效成分黄芩苷含量 并没有多大损失。说明在制剂生产过程中，酒黄芩的投 料完全可以采用冷水投料方法。在色谱条件下的流动 相选择中曾选择甲醇一水(40：60)，甲醇一0．2％磷酸水 溶液(40：60)分离效果均不理想，将磷酸水溶液调至 0．4 达到较好的分离效果且保留时问在8．5～9min。 该测定方法经方法学考察精密度高，重现性好，48h测 定稳定，回收率符合要求。