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| 高效液相色谱法测定妇乐颗粒中大黄素和大黄酚含量 |
妇乐颗粒处方由忍冬藤、大血藤、大黄(制)等10味中药组成，
具有清热凉血、活血化瘀、消肿止痛的功效，用于急性盆腔炎、急性
附件炎、急性子宫内膜炎等妇科炎症引起的带下、腹痛。目前，国内
有6家企业生产该品种，临床应用广泛。方中制大黄有泻火解毒、逐
瘀通经等作用，大黄素、大黄酚为主要活性成分 1。为更好地控制产
品质量，保障用药安全与有效，笔者参考有关文献 ～1，建立了同时
测定妇乐颗粒中大黄素、大黄酚含量的高效液相色谱(HPLC)法，
报道如下。
1 仪器与试药
Agilent 1 100系列液相色谱仪(自动进样分析)。大黄素、大黄酚
对照品(中国药品生物制品检定所，批号分别为110756—200110，
110796—200513，供含量测定用)；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其
余试剂均为分析纯；妇乐颗粒(杭州天目山药业股份有限公司，批
号为20061113，20061114，20061115)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：Zorbax Extend Cl 8柱(250 mm×4．6 mm，5 m)；流动
相：甲醇一0．1％ 磷酸溶液(80：20)；流速：1．0 mL／min；柱温：30℃ ；
检测波长：265 nm。在此条件下各组分分离良好，阴性对照品溶液
对测定无干扰(图1)，理论塔板数以大黄素峰计算应不低于8 000。
2．2 溶液制备
取大黄素、大黄酚对照品各适量，精密称定，分别加甲醇制成每1 mL含6 g和10 g的溶液，即得对照品溶液。取装量差异
项下的样品，研细，取约0．3 g，精密称定，置烧瓶中，加8％ 盐酸
溶液10 mL，再加三氯甲烷25 mL，加热回流1 h，放冷，混合液移至
分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，洗液并入同一分液漏斗
中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷振摇提取3次，每次10 mL，
合并三氯甲烷液，减压回收三氯甲烷至于，残渣加甲醇适量，微热
使溶解，放冷，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取
续滤液，即得供试品溶液。取不含大黄的阴性样品，同法制得阴性
对照品溶液。
2 3 方法学考察
线性关系考察：精密量取大黄素对照品(10．54~g／mL)、大黄
酚对照品(11．12 p~g／mL)混合溶液1，2，4，8，16，20 p．L，注入液相
色谱仪，记录色谱图。以进样量(Ixg)为横坐标、峰面积为纵坐标绘制
标准曲线，回归方程大黄素为Y=4 606．6 一4．613 7，r=0．9999
(n=6)，结果显示进样量在0．010 54—0．210 80 g范围内与峰面积
有良好线性关系；回归方程大黄酚为y=6 083．4 X一6．716 8，r=
1．000 0(n=6)，结果显示进样量在0．0l1 12～0．222 40 g范围
内与峰面积有良好线性关系。
精密度试验：精密吸取同一供试品溶液，连续进样。结果大黄
素、大黄酚峰面积的RSD分别为0．77％和0．50％(n=6)。
重现性试验：精密称取同一样品6份，按供试品溶液制备方法制
备并测定。结果大黄素的平均含量为106．67 g／g，RSD=2．05％
(n=6)，大黄酚的平均含量为161．72 g／g，RSD=1．45％( =6)，总
含量的平均含量为268．39txg／g，RSD=1．49％(n=6)。
稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，于0，4，9，13，21 h时
分别进样l0 。结果大黄素、大黄酚峰面积的RSD分别为0．53％
和0．52％(n：5)，表明供试品溶液在21 h内基本稳定。
加样回收试验：精密称取已知含量样品6份，精密加入大黄
素、大黄酚对照品适量，按供试品溶液制备方法制备，测定峰面积并计算回收率。结果见表1。
2．4 样品含量测定
取样品3批，依法制备供试品溶液并测定。结果3批样品每袋
含大黄以大黄素(C H 。0 )和大黄酚(C。 H。oO )的总和计分别为
1．56，1．58，1．59mg(n=2)。
3 讨论
方法学考察结果表明，该方法结果准确，重现性好，可有效地
控制该制剂的质量。
制备供试品溶液时，进行了提取方法的比较，结果采用水解中
直接提取大黄素、大黄酚的方法，较药典大黄含量测定项供试品前
处理简单，且效率相当。试验中还考察了色谱柱、柱温、流动相酸度
的变动对分离度等结果的影响，发现在测定条件下，系统的轻微变
动对试验结果影响不大，系统耐用性良好。
药品是特殊商品，必须符合安全、有效、可控、稳定的要求。质
量标准完善与否直接关系到上市药品质量控制水平的高低，关系
到药品的安全有效。本试验在妇乐颗粒原质量标准的基础上，增加
了大黄素、大黄酚含量指标的控制，对于进一步完善质量标准、加
强质量控制具有积极意义。
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