爬山虎(Parthenocissus tricuspichate Planch．)又 称爬墙虎，浆果为紫黑色，常攀缘在墙壁或岩石上， 广见于我国各地。常以根和茎入药，性温，味甘，有 祛风通络，活血解毒之功效Lz

 目前对爬山虎果实中提取色素的研究较多 4。，但 对其叶中色素的提取、性质及应用的研究尚未发现。 本课题组已采用传统溶剂浸泡法和超声提取法对爬山 虎叶子中红色素的提取工艺及性能进行了研究pJ，经 过我们相关研究还发现，此色素中还含有一定量的黄 酮类物质和一定量的原花青素。

 原花青素(Proanthocyanidins)简称PC，许多研 究表明，原花青素具有抗氧化l6J，清除自由基 】，抑制 肿瘤【8】，在体内其抗氧化能力是VE的5O倍，VC的20 倍 J。目前，原花青素已广泛应用于食品，药品，化 妆品等领域。为了更好的开发和综合利用天然爬山虎 资源，为了开发新品种的天然色素，本文利用高效液 相法测定从爬山虎叶中提取的红色素中原花青素的含 量，为其以后的开发利用提供理论依据。

 1 材料和方法

 1．1 实验设备、材料和试剂

 爬山虎叶子于秋天采自太原地区野生种类(晒干， 密封于冰箱中备用)，原花青素标品(南京替斯艾么中药研究所)，纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)， 甲 醇(色谱纯)，其余试剂均为分析纯(南京化学试剂有 限公司)。

 高效液相色谱仪(日本岛津20A)，SPD一2A双波 长紫外检测仪(日本岛津)，760CRT双光束紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)，FA1004N 型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)， KQ一250DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有 限公司)，HH一3型恒温水浴锅(江苏金坛医疗仪器厂)， 旋转蒸发仪(日本)，真空干燥箱(上海精密科学仪器 有限公司)。

 1．2 实验方法

 1．2．1 色谱条件

 色谱柱：C18柱(日本岛津5 pm；150 mrn~4．6 mm)，柱温：25 oC；流动相：V(甲醇)：V(Tk)：90：10， 检测波长：280 nlTl；进样量：20 ，流速：lml／min。

 1．2．2 爬山虎叶子红色素的制备

 称取研磨好过20目筛后的干燥爬山虎叶子2 g， 用95％乙醇做溶剂，以40：1的液料比，在60℃、超 声频率为100％、超声时间为55 min的条件下进行，将 粗提物过滤两次并收集滤液，减压浓缩后，置于真空 干燥箱内干燥得成品，产率约5．25％，乙醇回收率约 90％以上。准确称量3．0 mg色素加入少量流动相超声 溶解，用流动相定容至50 mL，备用。

 1．2．3 原花青素的标品溶液的配制

 精密称取原花青素标品10 mg，，置100 ml的容量 瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，配成100岭／ml的 原花青素的标准溶液。

 2 结果

 2．1 爬山虎红色素中原花青素样品的HPLC图谱

 取1．2．2中制备好的试液用0．45 pm的微孔滤膜的 过滤，弃去初滤液，取2O 的续滤液进样。结果如 图1所示。

 2．2 原花青素标品溶液的HPLC图谱

 取1．2．2中制备好的标液用0．45岬的微孔滤膜过 滤，弃去初滤液，取20 的续滤液进样。结果如图 2所示。

 2_3 标准工作曲线的绘制及检出限

 精密吸取原花青素标准溶液0．05 ml、O．25 ml、0．5ml、0．60 ml、0．75 ml的原花青素标准溶液，用流动相 稀释至刻度，摇匀。配成0．5 ／m1、2．5~tg／ml、5 ／mJ、 6 II11、7．5 m1的原花青素标准溶液，在上述色谱 条件下进样20 ， 以原花青素标准品的峰面积(A)与 对进样浓度fC)进行回归，回归方程为：A=252500．9C 一1 029．1，相关系数为0．9995，在0．50~7．5 ／lnL范围内 线性关系良好。检出限为：0．20-15}l 11L。

 2．4 方法的精密度

 精密吸取原花青素标准溶液(5．0,g／mY)20 ，重 复进样6次，测得峰面积，实验结果见表1。实验结果 显示6次测定原花青素峰面积的RSD 为1．O％。

 精密吸取原花青素标准溶液0．05 mL，0．10 mL， 0．15 mL各5份，分别加入已知含量为6．68~pdmL的供 试品溶液3 mL，再加流动相稀释至10 n1L，按上述色 谱条件测定，根据测定结果计算回收率，结果见表2。

 2．6 试样中原花青素含量的测定

 对试样按照1．2-2方法进行制备，精密吸取试样溶 液，按上述色谱条件，测定6次，取平均值。按外标 法计算所得爬山虎的原花青素含量，平均含量为6．8 ／mL。即制得的色素固体中含有原花青素1 1．3％ 。

 3 结论

 爬山虎叶中红色素的稳定性比较强【5】，而且其红色 素中还含有较多的原花青素，用HPLC法测定原花青 素含量，简便易行，数据合理可靠，由于原花青素的 丰富的生理功效，因而爬山虎中红色素适合于作为食 品色素，可广泛应用于食品、化妆品、保健品等领域。