| 当前位置 : 首 页 >> 大黄酸 >> 正文阅读 |
 |
| 18β-甘草酸对大黄酸在大鼠体内药物动力学的影响 |
大黄酸为传统中药大黄中的有效成分，具有抗肿
瘤、抗氧化、抗癌、抗炎、抗菌、降脂等多种作
用【l_。甘草酸是甘草中最主要的活性成分，以1813一甘
草酸和18仅一甘草酸两种构型存在，18B一甘草酸为甘
草中的主要成分【2j。甘草酸具有抗炎、抗病毒、降血
脂、抗氧化、保肝、解毒等作用 。甘草酸可对肝脏
中的CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4等多种酶产生诱导
或抑制作用l 4_，本实验研究1 813一甘草酸对大黄酸在大鼠体内药物动力学的影响。
1材料与方法
1．1仪器1100高效液相色谱仪(美[]Agilent~_} ，
Agilent32作站)；BP21 1D电子天平(赛多利斯)；氮吹
仪(天津奥特赛恩斯公司)；KDC一16H高速离心机
(科大创新公司)；SK—l型快速混匀器(江苏医疗仪器
厂)。
1．2药品与试剂大黄酸对照品(中国药品生物制品
检定所，批号：0757—200206)；大黄酸原料药(南
京泽朗医药科技有限公司，含量≥98％。)；1813一甘草
酸原料药(西安富捷药业有限公司，含量>98％)；色
谱纯甲醇(Fisher公司)；其余试剂均为分析纯。
1．3实验动物清洁级SD大鼠，雄性，体重200～240
g ， 华北煤炭医学院动物中心提供，动物许可证号：
SCXK(京)20060330。
1．4给药方案16只SD大鼠适应性饲养1周后，随机
分为大黄酸组，甘草酸+大黄酸组。实验前12 h禁
食， 自由饮水。用0．8％的羧甲基纤维素钠溶液分别
将大黄酸和甘草酸制成混悬液。灌服时，大黄酸组按
50 mg·kg 的剂量给药，甘草酸按10 mg·kg 的剂量给
药【5】。于给药后0．083、0．167、0．25、0．5、1、2、3、
4、5、8、10 h大鼠眼眶静脉丛取『lⅡ0．5 mI 于肝素化
试管中，12000 r．min 离 65 rain，取上清液100 IXI ，按“血浆样品处理方法”项下同法操作，记录大黄酸
峰面积。
1．5血浆样处理方法将血浆样品置于涂有肝素抗凝
剂的具塞离心管中，12000 r·rain一离 b5 rain，分离血
浆，取0．2 mI血浆，加入0．5 mL色谱纯甲醇，涡旋混
合振荡30 s，12000 r·min 离 65 rain，沉淀蛋白，提
取大黄酸，取上清液经0．45 Ixm微孔滤膜过滤，20 L
进样测定大黄酸的峰面积 。
1．6色谱条件 色谱柱为Agilent公司Zorbox SB C18
(150 minx4．6 mm，5 Ixm)；流动相为甲醇一水一冰醋
酸(77：22：1)；检测波长为428 nm；流速为1．0
mL·min ；柱温为室温 。
1．7方法专属性空白血浆、空白血浆加大黄酸对照
品、大鼠灌服大黄酸和甘草酸+大黄酸后含药血浆的
色谱图，见图l～3。由图1～3可知，在选定的色谱条
件下，血浆中内源性成分不干扰大黄酸的测定。
1．8标准曲线精密量取大黄酸对照品溶液适量，置
于离心管中，加人大鼠空白血浆100 IXL，制成大黄
酸浓度分别为0．1，1．0，2．0，5．0，7．0，12．0，15．0
Ixg·mL--的系列血浆样本，按“血浆样品处珊方法”
项下操作， 以对照品峰面积l，，大黄酸血药浓度 ，
进行线性回归，得线性回归方程y=33．182X+1．01l(r=
0．999 4)，样品在0．1～15 Ixg·mL 范同内线性关系良
好。
1．9精密度实验分别取大黄酸对照品溶液制成浓度
为1．0，5．0，12．0 g·inL一的血浆样品，每个浓度平行
作5份，按“血浆样品处理方法”项下操作，在1 d
内测定5次。结果低，中，高3种浓度血浆样品的
RSD值分别为5．78％、4．10％、5．34％。日问精密度
同上法制备血浆样品，每天测定1次，连续测定5 d。
结果低，中，高3种浓度血浆样品的RSD分别为6．33
％ 、5．08％ 、5．52％ 。
1．1O提取回收率精密量取100 IXL空白血浆置于离
心管中，分别加入适量的大黄酸对照品溶液，制成浓
度分别为1．0，5．0，12．0 g·mL一的血浆样品，按“血浆样品处理方法”项下操作，进样测定，记录大黄酸
峰面积S，另取1．0，5．0，12．0 Ixg·m『『J大黄酸对照品
溶液，氮吹仪吹干后加流动相100 IXL溶解，20 L进
样测定，记录大黄酸峰面积A，提取回收率=S／Ax1O0
％，求得大黄酸的提取回收率分别为88．O5％、87．12
％、89．07％。其平均回收率大于85％符合药物动力
学研究要求。
1．11稳定性实验取大黄酸对照品溶液适量，制成
浓度为1．0，5．0，12．0 Ixg·mL一低，中，高3个浓度的
血浆样品，在一20℃条件下存放5 d，室温放置12
h，冻融3次。按“血浆样品处理方法”项下操作，
进样测定。结果低、中、高3个浓度样品测定值的
RSD分别为6．37％、5．67％ 、4．77％。表明样品在该
实验条件下稳定。
2结果
2．1统计分析方法所得数据采用3P97软件，拟合
药物动力学房室模型，计算药物动力学参数。大黄酸
组与甘草酸+大黄酸组之间的差异采用t检验进行统计分析。
2．2血浆中大黄酸的药物动力学参数大鼠灌服大黄
酸和甘草酸+大黄酸后，血药浓度数据经3P97计算药
物动力学参数。确定大黄酸在大鼠体内药物动力学过
程均符合二房室模型，两组主要药物动力学参数见
表l，平均血药浓度一时间曲线见图4。
3讨论
大鼠灌服大黄酸和甘草酸+大黄酸后，血浆中可
检测到的主要成分为大黄酸。大黄酸与其他成分达到
基线分离，说明此条件下血浆内源性物质不干扰大黄
酸的测定。从药时f#1线图4可知，给药后50 min左
右，大黄酸血药浓度达到峰值，说明大黄酸在大鼠体
内迅速吸收入血。
大鼠灌服大黄酸与甘草酸+大黄酸后，Cmax分别
为10．91 btg·mL 和5．25 g·mL一，AUC分别为293．5h·mg·L一和16．00 h·mg·L。经两组样本t检验，结果
达峰浓度Cmax和血药浓度一时问曲线下面积AUC的差
异均具有显著意义(P<0．05)。大鼠灌服大黄酸所得
Cmax，AUC值大于灌服甘草酸+大黄酸，表明甘草
酸对大黄酸在大鼠体内药物动力学过程产生影响，使
大黄酸的生物利用度下降，t． Ka明显减小。说明
18[3一甘草酸X~CYP450酶产生了诱导作用，使酶的活
性增强，加快了大黄酸在大鼠体内的代谢。使用甘草
或甘草酸与其他药物配伍时，应特别注意甘草酸对
CYP450的诱导或抑制作用 I。
|
|
|
|
