关键词:双波长标准加入法 芦荟大黄素甙 芦荟大黄素 含量 中药

 芦荟为百台科植物库拉索芦荟．好望角芦荟或 斑纹芦荟叶中的液汁经浓缩的干燥品 关于芦荟的 功用古代早有记载+主要用于泄热通便．清肝泻火， 杀虫疗疳 ．现在临床上常用于抗菌、消炎、止血、抗 肿瘤等 芦荟的多种药理活性主要与其含有的蒽 醌衍生物有关．尤其是芦荟l犬黄素甙及其甙元芦荟 太黄紊。中国药典(1 995年版)与BP{1 993)均采珂』通 过测定总蒽醒以测定芦荟苷含量．测定结果均偏 高 我们使用双波长标准加入法同时测定芦荟大 黄素甙和芦荟大黄紊的含量．结果令人满意。。且方 法简便可靠，重现性好，为开发利用我国芦荟的药用 资源提供科学依据。

 1 材料与方法

 1．1 仪器

 723型可见分光光度计(22海精密科学 仪器有限公司分析仪器总厂)。

 1．2 试剂

 1．0mmoI·I 芦荟大黄紊甙(芦荟甙) 标准溶液：准确称取10．5rng芦荟大黄素甙对照品 (中国药品生物制品检定所)．用少量无水乙醇溶解． 并定窖r 25ml容量瓶中。】0mmol·I ‘芦荟大黄 素标准溶液：准确称取芦荟大黄素对照品(中国药品 生物制品检定所)6．8nlg，用乙醇溶懈并定容至 25mi 其它试剂均为分析纯．水为取蒸水。

 1 3 实验方法

 取一组相同量的样品于25m1容量 瓶中．分别加入不同量的芦荟大黄素甙标准溶液．用 无水乙醇定容。以无水乙醇为参比，分别测定各溶液 在361．4nm和480．jnill波长处的吸光度值．然后对 芦荟大黄素甙的加入量c进行一元线性回归．得刮 两条目归直线。计算两回归线的交点H( ．A。j，C。 即为所取试样中芦荟大黄素甙的含量．A．为试样中 芦荟大黄素所产生的吸光度值，将其代入芦荟大黄 素的回归方程中．即可求出试样中芦荟大黄素的含 量：

 2 结果

 2．1 吸收光谱与测量波长的选择

 分别取2．anti 芦荟大黄素甙和芦荟大黄素工作标准液于两个 25mI容量瓶中．用无水乙醇定容 以无水乙醇为参 比一在波长330nm～550rim 间扫描，吸收光谱(见图 1)，芦荽大营索甙和芦荟大黄素的最 吸收波长分别为361．4nm和431．9rim。以芦荟大黄紊甙作为标 准加A组分，根据双波长等吸收点选择的精选法和 作图法，选择芦荟大黄素的等吸收点波长361．4nm 和480．5nm作为测量波长

 波长(nm

 图1 吸收光谱图

 — — 芦荟大黄素甙⋯ 一芦荟大黄素

 2．2 线性范围

 试验结果表明，芦荟大黄素甙和芦 荟大黄素的工作曲线的线性范围均为0～1×10一 mo[·I 。

 2．3 芦荟大黄素的回归方程

 分别取不同量的芦 荟大黄素工作标准液于25rnl容量瓶中．用无水乙醇 稀释至刻度．摇匀。以无水乙醇为参比．在361．4nm 或480．5nm处测量吸光度值 以吸光度A对芦荟大 黄素含量进行一元线性回归．得芦荟大黄紊的回归 方程：A一2．9l> l0℃+7．687×10 ，r一0．9994(见 图2)。

 C(1o。 mol／L)

 图2 芦荟大黄素l的工作曲线

 2．4 吸光度的加和性

 用对照品配制适当浓度的 芦荟 黄素甙和芦荟大黄紊混合溶液，试验结果表 明．在符合比尔定律的线性范围内．两种物质在测量 波长下的吸光度加和性良好．对芦荟大黄素甙和芦荟大黄素测定的相对误差均小于±5％

 2．5 被测成分浓度的计算

 2．s，1 直接作图法

 根据上述选择的波长进行标 准加八测量．将获得的吸光度对标准加八的浓度作 图．得到两条直线。两条直线的交点为H．H 点在横 坐标上的投影与原点的距离为待测成分的浓度．纵 坐标表示干扰物产生的吸光度值。

 2．5．2 线性方程回归法

 将标准加人测量获得的吸光度对标准加人的浓度c进行线性回归，可得到 两个线性回归方程，其共同的解C 即为被测成分的 浓度．A 为干扰成分产生的吸光度。

 用上述两种方法对芦荟大黄素甙和芦荟太黄素 的人工合成样进行双波长标准加入测定．其结果如 表1所示 由表l可见，两者的准确度和精密度都令 人满意。因而，在实际测定时可任意选择一种方法

 图I 作图法和线性回归法所得计算结果的比较

 2 6 样品分析

 切割已成熟的库拉索芦荟叶片g 片，清洗干净，其中取3片芦荟叶迅速把皮和凝胶分 离开，并精确称取凝胶、皮、全叶的质量。粉碎后残渣用无水乙醇提取4次，每次用量10m1．过滤并定容于 100ml容量瓶中。按实验方法测定芦荟大黄素甙和 芦荟大黄素的含量，测定结果(见表2)

 图2 芦荟不同部位芦荟甙和芦荟大黄素含量

 2．7 回收率试验

 在样品中加入不同量的芦荟大黄素甙、芦荟大黄素标准液，利用本法进行回收率试验．结果(见表3) 回收率均在100 ±5 内．准确性好。

 表3 回收试验结果

 3 讨论

 3．1 双波长分光光度法用于多组分相互干扰体系 的测定．主要有等吸收点法和系数倍率法等。这两种 方法通常是测量信号下降以消除共存物干扰．改善 选择性，但在～ 定程度上降低了灵敏度。通常的标准 加八法是由单一响应模型校正完成的，此时只适下 干扰不存在或预先知道．当共存物浓度或信号未知 时．则无法进行校正。根据标准加入法特点和双波c圭 等吸收法原理而提出的双波长标准加入法将两者有 机地结台起来，达到改善选择性又不降低灵敏度的目的。

 3．2 通过对库拉索芦荟(Aloe vera T ．)叶片不同部 位芦荟大黄素甙和芦荟大黄素含量的测定，说明芦 荟大黄素甙和芦荟大黄素主要存在于叶片表皮．为 芦荟药用成分的提取利用提供了依据.