环糊精(cyclodextrin简称CD)具有中内疏水、外亲水的圆筒状结构，能与多种疏水性客体化合物形 成包合物⋯。最常见的环糊精是由6～8个D一(+)．2吡喃葡萄糖以 一1，4一苷键连接而形成的分别含有 6、7和8个葡萄糖单元的 ．、 ．和 ．CD。

 环糊精与药物分子生成包合物反应的平衡常数是判断环糊精与药物分子形成包合物时结合力强弱 的重要参数。目前，测定环糊精与药物包合反应平衡常数的方法有很多_2]，常见的有紫外一可见分光光 度法、高效液相色谱法、核磁共振法、荧光法、电位法 3]、相溶解度法等。王小萍等[4]用薄层色谱法测定 了大黄类药物与环糊精的包合常数。

 本文采用毛细管电泳淌度移动法测定了口．环糊精与芦荟大黄素包合反应的平衡常数。淌度移动 法 是通过测定溶质在含有不同浓度配体的缓冲溶液中的电泳淌度(或迁移时间)的变化来计算平衡 常数的方法。该法要求溶质分子和结合物的迁移率要有差别，并且平衡时间要小于分离时间。由于迁 移时间的重现性较好，可适用于大部分亲和体系，已广泛用于平衡常数的测定。

 1229型高效毛细管电泳仪(北京新技术应用研究所)，紫外检测器在254 nm波长下检测；石英毛细 管柱(河北永年光导纤维厂)内径75 m，总长度60 cm，有效长度50 cm。芦荟大黄素(中国药品生物制 品检定所)，JB．CD(上海三浦化工有限公司)，实验用水为二次蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

 芦荟大黄素储备液配制成3．10×10 mol／L的甲醇溶液，电泳进样样品浓度0．966×10-4 moL／L； 一CD储备液的配制是将4．54 g JB．CD与1 1．16 g尿素(增溶)共溶于20 mL二次蒸馏水中配制成卢-cD 浓度为0．2 mol／L：硼砂缓冲溶液浓度为0．1 moL／L(pH=9．7)，电泳时稀释为0．015 mol／L。

 电泳电压为20 kv，10 cm高度差进样1 min，柱温2O℃ ，紫外检测器检测波长为254 nm。毛细管电 泳仪使用前需预热2h，并依次用0．1 mol／L的NaOH、二次蒸馏水冲洗5 min，再用运行缓冲溶液冲洗 2 min 一次电泳结束后用0．1 mol／L NaOH、二次蒸馏水各冲洗2 min再进行下一次的电泳实验。当日 实验完毕应用0．1 mol／L的NaOH、二次蒸馏水冲洗5 min。

 芦荟大黄素浓度始终保持为0．966 X 10一mol／L，改变 ．CD浓度进行毛细管电泳。电泳缓冲溶液 中口 CD的浓度变化范围为0～0．06 mol／L，溶剂为0．015 mol／L硼砂缓冲溶液(pH=9．7)。样品中加入 甲醇以增加芦荟大黄素在样品液中的溶解度，也用作测定电渗流的中性标记物。

 平衡常数的计算方法 ：因文献" 报道，芦荟大黄素能与 ．CD形成l：1的包合物。缓冲溶液中 一CD(CD)和药物(D)的包合反应为：

 CD +D == CD ·D

 反应的平衡常数 为： K =[CD·D 3／([CD][D]) (2) 若以厂表示CD·D占样品中总D中的比例，则： f=[CD·D]／([D]+[CD·D]) (3) 结合了的CD·D与D的迁移速度不同，即电泳淌度不同，则： D C = (1一 D+fgcD．D (4) 其中 是一定卢．cD浓度c(cD)下药物的电泳淌度， 。是缓冲溶液中没有添加 ．CD时药物的淌 度， 。是药物和卢一CD包合物的电泳淌度。

 由公式(3)得： 即： f=( CI 。一 D)／(gcIJ_D一 D) (5) 由公式(2)、(3)得： 1 1 ． ⋯ 7 川 (6) 根据公式(5)、(6)可得出： =一 壶⋯ 八c c(cD) + ㈩ 式中，△ ： CD。一 D，△ =／zcD．D一 D。

 当以不同浓度的 ．CD作为缓冲溶液．以一定浓度药物作为样品进行电泳实验时，可以得到药物的 保留时间￡cD和空白峰的保留时间t ，由 c =tR／ 。，故可由t的比值+⋯- 10 的比值。以l cD对 1／c(cD)进行线形回归，得到直线的截距和斜率之比即是 。药物的淌度随 ．CD浓度增大而减小。这 种变化趋势主要来源于两方面，一是环糊精浓度升高后，药物与环糊精形成的包合物由于具有更大的质 荷比而使淌度明显变小，二是背景电解质溶液的粘度随环糊精浓度的升高而增大，从而降低溶质的淌 度。为了扣除因粘度引起的淌度的变化。在样品中加入中性内标物，利用样品的淌度 。与中性内标物 淌度 之比代替 ： 来消除粘度对淌度的影响，即用粘度校正后的AMcD代替公式(7)中的△ 。。则 公式(7)变为： = )( )+ 1 △ 。一 AM (8) m a c(cD) △ 。 式中，△ = R-／xD R，AM =／xcD．。 R— 。 R。

 结果与讨论

 表1为在硼砂缓冲溶液(pH=9．7)中当』B—CD的浓度从0．015 mol／L增加至0．06 mol／L时，芦荟大黄素与卢一CD包合物的保留时间的变化和参比物甲醇保留时间，以表中数据做1／c(CD)对1／AM~o。曲线 及线性回归曲线，如图1所示。

 线形回归方程为：Y=12．127 13+0．441 5X(r=0．994 39)，计算得包合反应的平衡常数为：K = 27．5 lgmol

 一般认为 一环糊精与小分子的包合过程主要 通过疏水作用、范德华力和氢键3种作用力 引。关于哪种力起主要作用则取决于客体分子的亲水性和结构。因芦荟大黄素具有强疏水性．几乎不溶于水 只溶于有机溶剂，与环糊精包合作用力应以疏水作用力为主。