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| RP-HPLC法测定穿琥宁注射液中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的含量 |
穿琥宁注射液是由穿心莲提取物制成的中药注射剂，有
增强机体吞噬细胞功能及退热、抗炎作用，目前已被广泛用
于病毒感染性疾病的治疗 。本研究以其主要成分脱水穿
心莲内酯琥珀酸半酯作为指标成分，采用RP—HPI C法对穿
琥宁注射液进行了含量测定 ，为穿琥宁注射液的质量控制
提供依据。
1 仪器和试药
1．1 仪器 Agilent一1100型高效液相色谱仪，包括真空脱
气机、四元梯度泵、自动进样器和二极管阵列检测器(DAD
检测器)和Agilent—Chemistation数据处理系统(Agilent公
司)；超纯水发生器(美国Millipore公司)。
1．2 试药脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品(中国药品
生物制品检定所，批号11l598—200301)；穿琥宁注射液(市
售，规格100 ml ：100 mg，批号07090l、070902、070903)；甲
醇为色谱纯．水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法和结果
2．1 色谱条件和系统适用性实验Hypersit ODS C。 色谱
柱(250 mm×4．6 mm，5 m)；流动相：甲醇：0．05 磷酸二
氢钾溶液(用磷酸调pH 值为2．50±0．05)一7：3；流速：
1．0 mI ／min；检测波长为251 nm；进样量2O L。理论塔板
数按脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯计为7 436。
2．2 对照品溶液的制备 精密称取经6o℃ 干燥至恒重的
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品10 mg，置100 mL量瓶
中，用流动相溶解，稀释至刻度，摇匀，再精密量取5 mI 置
1O mI 量瓶中，用流动相稀释到刻度，摇匀，即得脱水穿心莲
内酯琥珀酸半酯浓度约为50 btg／ml 的对照品溶液。
2．3 供试品溶液及阴性样品溶液的制备精密吸取穿琥宁
注射液1 mI 置200 mI 量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻
度．摇匀，再精密量取5 mI 置1O mI 量瓶中，用流动相稀释到刻度，摇匀，即得。按处方称取除脱水穿心莲内酯琥珀酸
半酯外的其他成分及辅料，制成阴性样品溶液。分别精密吸
取对照品溶液与供试品溶液各20 L进样，得色谱图见图1。
2．4 线性关系考察精密称取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯
对照品1O．98 mg置100 mI 量瓶中，用流动相溶解并稀释
至刻度，摇匀，分别精密量取1、3、5、7、9 mL置lO mL量瓶
中，用流动相稀释至刻度，摇匀，分别精密量取2O I 进样，
按2．1项下色谱条件测定，记录色谱图，以对照品浓度(r)为
横坐标，峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，回归方程为：
A一19．741 f+15．707，r一0．999 9，表明脱水穿心莲内酯琥
珀酸半酯浓度在1O．98～ 98．82~g／mI 范围内与峰面积呈
良好的线性关系。
2．5 重复性和稳定性实验 取穿琥宁注射液样品(批号
070901)6份，按2．3项下方法配制溶液并按2．1项下色谱
条件测定，以脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯计算，平均含量为
97．5O ，RSD为0．33 (”一6)。取同一供试品溶液于0、2、
4、6、8 h进样，以峰面积计算，RSD为0．19 (”=6)，表明样品溶液在8 h内稳定。
2．6 精密度实验取对照品溶液．按2．1项下色谱条件连
续进样6次，记录峰面积，结果RSD为0．23％，表明仪器精
密度良好。
2．7 专属性实验取阴性样品溶液，按2．3项下方法处理
后进样，结果对测定无于扰(见图1)．表明该方法专属性良
好。
2。8 回收率实验按处方配制低、中、高3种不同浓度的溶
液各3份，按2．3项下方法操作后进样，计算回收率。结果
见表l。
2．9 含量测定 取批号为070901、070902、070903的样品，
按2．3项下方法配制溶液．精密量取2O L进样测定，按外
标法以峰面积计算，结果3批样品含量分别为标示量
(100 mg)的97．9 、97．2 和97．3 (12—3)。
3 讨论
作者曾尝试以下流动相条件：甲醇：0．05 磷酸二氢钾
溶液一7：3，用磷酸分别调pH 值为(3．50±0．05)、(2．50_4-
0．05)和(2．00±0．05)。结果表明pH值对系统影响较大．
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯在pH 为2．50±0．05时保留时
间较适合．峰形较好，故选用甲醇：0．05 磷酸二氢钾溶液
(用磷酸凋pH值为2．5O±0．05)一7：3为流动相。方法学
研究结果表明，该法操作简便．结果准确，重复性好，能够作
为该制剂的质量控制方法。
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