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薄层扫描法测定穿心莲中脱水穿心莲内酯的含量
    摘 要:

采用双波长薄层扫描法测定穿心莲中脱水穿心莲内酯的含量,方法简便,样品回收率为99.9%。

 关键词:薄层扫描法 穿心莲 脱水穿心莲内酯 含量测定

 穿心莲Andrcgraphis paniculata(Burn.f.)Nees 收载于1995版中国药典,具有清热解毒、凉血,消肿 的功效。已有报道从穿心莲中分离出穿心莲内酯 ( 口出:印pb de)、新穿心莲内醋(Neomu:h.~ra— pholide)、脱氧穿心莲内醋(14 一Deoxyan— drographolide)、脱水穿心莲内醋(14一deox3,一11,12 一Deh~ holide)等12种内醋类戚份“ 。 现有的测定方法有碱水解法 、比色法[3]、薄层扫描 法“l5],主要测定前3种内醋或总内醋的舍量。本实 验通过薄层检查,发现脱水穿心莲内酯和脱氧穿心 莲内酯具有相同的 值,两斑点重舍,难以分开.但 利用其紫外最丈吸收波长的差别.采用双波长薄层 扫描法仍可测定脱水穿心莲内酯的舍量。

 1 实验部分

 1.1 仪器与试剂

 日本岛律CS一930双渡长薄层扫描仪;薄层点 样仪(CAMAGNANOMAT Ⅲ);双槽展开缸10cra× 20cm(CAMAG))。

 硅腔G .青岛海洋化工厂生产(薄层色谱 用)。

 所用试剂均为分折纯。

 1 2 实验条件

 1.2.1 薄层色谱条件

 硅腔GF’m板,10cra×20cn’,_,以0 3% 羧甲基纤 维索钠为牯合剂,厚度500.tan,110℃ 活化l小时备 用。展开荆为氯仿一丙酮(15:7.5)。

 薄层展开后,脱氧穿心莲内酯点样量在20旭以 下时.置紫外光灯(254nm)下柱规,无紫红色暗斑。 喷2% 3.5一二硝基苯甲酸己醇溶液与2m0j,L氢氧 化钾溶液的等量{昆合液.日光下观察脱氧穿心莲内 葺旨呈暗紫红色斑点.井持续十几分钟后缓慢担色;脱 水穿心莲内硝呈紫红色斑点,立即槎色。

 1 2 2 扫描条件

 以上对照品在紫外光区(200~370nm)的吸收光 谱圜见图1。

 采用双波长反射法线性扫描, =.263ran,^R= 371)nm 。

 L3 标准曲线绘制

 取经真空干燥24小时后脱水穿心莲内醋对照 品5mg.精密称定,置5ml量瓶中,用己醇溶解井定 容。精密吸取上述对照液0.5 1.2、3、4、5|^1分别点 样、展开、扫描测定。以对照品溶液浓度为横坐标。 斑点面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线.得回归方 程:Y=0.054+2.337X.r=0 988。线性范围为0. 45-4.50.ttg。

 1.4 穗定性试验

 精密吸取对照品溶液适量、点样、展开.每隔一 定时问扫描测定,结果样品斑点积分值在2.5小时 内基本稳定。

 1.5 点样精密度试验

 精密吸取对腻品溶液适量点样.共6个点.展 开,扫描测定其积分值.RSD=2.79% 。

 1.6 回收率试验

 精密称取穿心莲药材粗粉0.25g,加^已知浓度 的对照品溶液.同样品测定项下测定,回收串平均值 为99.9%(n=5,RSD=2.70%)。

 1.7 样品测定

 取穿心莲药韦|粗粉0.5g,精密称定,加乙醇 50ml拎浸30分钟,再超声波振荡提取30分钟,滤过.残渣用乙醇适量洗涤三孜,合并滤渡,蒸干,残渣 用乙醇适量溶解并定客至lOmi,作为供试品溶液。 精密吸取供试品溶液2}^1、对照品溶液l}^1与3 ,分 别点于同一薄层板上,依法展开,扫描测定。共测定 了l4个不同来源的样品.并且分叶和地上部分分别 测定。测得结果见表1。

 2 小结

 2.1 样品提取曾试用乙醇热回藏提取、冷浸过夜以及超声浴振荡提取三种方法.结果以本文所用的方 法最为简便、快速、提取效果好。薄层展开时.室温 应控制在26℃ 左右。

 2.2 通过测定,发现穿心莲叶中脱水穿心莲内酯的 含量差异较大,而且叶的含量普遍高于茎枝,因此中 国药典(95版)在“穿心莲”检查项中规定叶不得少于 35%,为药材质量提供了保证。

 
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