1 仪器与材料

 Bamstead International显微熔点测定仪(温 度未校正，美国美瑞泰克科技有限公司)，ARX一 300、AV-600核磁共振光谱仪(TMS为内标，瑞士 Bruker公司)，FL2200液相色谱仪(浙江温岭福 立分析仪器有限公司)。

 羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH一20，美国Pharmacia公司)，薄层色谱硅胶 (10～ 40 m，青岛海洋化工有限公司)，柱色谱硅胶 (5O～71 txm，青岛海洋化工有限公司)，十八烷基 键合硅胶(ODS，l0—30 ixm，天津化学试剂二厂 色谱技术开发公司)，甲醇(色谱醇，天津康科德科 贸有限公司)，其他试剂(分析纯，山东禹王实业有 限公司)，氘代试剂(中国科学院武汉波谱公司)。

 药材购于沈阳药材市场，由沈阳药科大学中 药学院孙启时教授鉴定为瑞香科瑞香属植物芫花 (Daphne genkwa Sieb．et Zucc．)的干燥花蕾。

 2 提取分离

 取醋炙芫花5 ，用体积分数95％ 的乙醇 55 L回流提取3次，每次4 h；提取液减压浓缩，除 去醇后制成水混悬液，依次用石油醚、氯仿、乙酸 乙酯萃取，得石油醚萃取物104．2 g，氯仿萃取物 139．5 g，乙酸乙酯萃取物73．5 g。氯仿萃取物经 5O一7l m硅胶柱色谱分离，用石油醚一丙酮系统 (体积比200：0一O：1)梯度洗脱。其中100：7流 份在回收溶剂后析出的大量黄色沉淀经甲醇反复 清洗得化合物1(1．6 g)；100：l流份经硅胶柱色谱 分离、石油醚一乙酸乙酯系统(体积比100：0～0：1)梯度洗脱得化合物4(30 mg)；100：10流份经硅 胶柱色谱分离、石油醚一丙酮系统梯度洗脱，再经 薄层硅胶板制备得化合物6(11 mg)；100：20流 份经硅胶柱色谱分离、石油醚一丙酮系统梯度洗 脱，回收溶剂后析出的大量黄色结晶经反复羟丙 基葡聚糖凝胶LH-20柱色谱纯化、氯仿一甲醇(体 积比1：1)洗脱，得黄色针晶化合物2(616 mg)； 100：1流份又经HPLC分离得化合物7(8 mg)、9 (10 mg)。乙酸乙酯萃取物经5O一7l m硅胶柱 色谱分离，用氯仿一甲醇系统(体积~L200：0～0：1) 梯度洗脱。其中100：7流份析出的黄色沉淀经甲 醇反复清洗得化合物5(2．6 g)；除去沉淀后的 100：7流份经ODS柱梯度洗脱、HPLC制备得化 合物3(12 mg)、8(16 mg)。

 3 结构鉴定

 化合物1：黄色不定型粉末(石油醚一丙酮)， mp 285．0～286．0 oC。三氯化铁一铁氰化钾反应 阳性，示有酚羟基存在；盐酸 粉反应阳性，推测 为黄酮类化合物。。H—NMR(300 MHz，DMSO一 比) ：6．39(1 H，S，H一3)、6．78(1 H，brs，H一6)、 6．86(1 H，brs，H-8)、7．97(2 H，d，J=7．8 I-Iz，H一 2 ，6 )、6．94(2 H，d，J=7．8 Hz，H-3 ，5 )、l2．97 (1 H，S，5一OH)、1O．40(1 H，S，4L0H)、3．87(3 H，S，7一OCH3)。 C—NMR(75 MI’-Iz，DMSO— d6) ：164．1(C一2)、103．1(C一3)、182．0(C一4)、 157．3(c_5)、98．0(C-6)、165．2(C一7)、92．7(C一 8)、161．4(C一9)、104．7(C一10)、121．1(C一1 )、 128．6(C一2 ，6 )、161．3(C一4 )、116．1(C一3 ， 5 )、56．1(7-OCH )。以上数据与文献[1]对照 一致，故确定化合物1为芫花素(genkwanin)。

 化合物2：黄色结晶(甲醇)，mp 270．0— 271．0 oC。三氯化铁 氰化钾反应阳性，示有酚 羟基存在；盐酸一镁粉反应阳性，推测为黄酮类化 合物。 H—NMR(300 MHZ，DMSO—d6) ：6．72 (1 H，S，H一3)、6．38(1 H，d，J=2．1 Hz，H一6)、 6．74(1 H，d，J=2．1 Hz，H一8)、7．44(2 H，m，H一 2 ，6 )、6．91(1 H，d，J=8．1 Hz，H一5 )、l2．99 (1 H，S，5一OH)、3．87(3 H，S，7一OCH3)。 ”C—NMR(75 MHz，DMSO—d6) ：164．3(C一2)、 103．1(C一3)、181．9(C一4)、157．3(C一5)、98．0 (c )、165．2(C_7)、92．7(C一8)、161．3(C一9)、 104．7(C—l0)、121．4(C一1 )、113．6(C-2 )、145．8 (C一3 )、149．9(C一4 )、116．0(C一5 )、119．2(C一 6 )、56．1(4-OCH )。确定化合物2为3L羟基芫 花素(3 一hydroxy—genkwanin)。

 化合物3：黄色结晶(甲醇)，mp 341．0— 342．0 oC 。三氯化铁—铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在；盐酸一镁粉反应阳性，推测为黄酮类化 合物。 H—NMR(300 MHz，DMSO—d6) ：6．74 (1 H，s，H一3)、6．16(1 H，d，J=1．8 Hz，H一6)、 6．44(1 H，d，J=1．8 Hz，H一8)、7．92(2 H，d，J= 8．4 Hz，H-2 ，6 )、6．93(2 H，d，J=8．4 Hz，H_3 ， 5 )、12．9(1 H，s，5一OH)。其 H—NMR谱数据与 文献[2]对照_致，故确定化合物3为芹菜素 (apigenin)。

 化合物4：黄色针状结晶(石油醚一丙酮)， mp 166—169℃ 。三氯化铁一铁氰化钾反应阳 性，示有酚羟基存在；盐酸 粉反应阳性，推测为 黄酮类化合物。 H—NMR(300 MHz，DMSO· ) ：6．93(1 H，s，H-3)、6．38(1 H，d，J=2．1 Hz，H一 6)、6．80(I H，d，J=2．1 Hz，H一8)、8．07(2 H，d， J=8．7 Hz，H一2 ，6 )、7．13(2 H，d，J=8．7 Hz， H ，5 )、12．9(1 H，s，5一OH)、3．85(3 H，s，7一 OCH )、3．86(3 H，s，4 一OCH )。”C—NMR (75 MHz，DMSO—d6) ：164．1(C一2)、103．9(C一 3)、182．3(C_14)、157．6(C-5)、98．4(c_16)、165．5 (C1)、93．0(C．8)、162．7(c_J9)、105．0(C一10)、 122．9(C一1 )、128．7(C一2 ，6 )、161．4(C一4 )、 114．9(C一3 ，5 )、56．4(7一OCH )、55．9(4 一 OCH，)。以上数据与文献[3]对照一致，故确定 化合物4为洋芹素一4 ，7一二甲醚(4 ，7-dimethyl— apigenin)。

 化合物5：黄色粉末，mp 263℃。三氯化铁一 铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在；盐酸一镁粉 反应阳性，推测为黄酮类化合物。 H—NMR (300 1VIHz，DMSO-d6)6：6．15(1 H，d，J=1．8 Hz， H-16)、6．39(1 H，d，J=1．8 Hz，H_8)、8．00(2 H， d，J=8．4 Hz，H-2 ，6 )、6．87(2 H，d，J=8．4 Hz， H_3 ，5 )、12．58(1 H，s，5 OH)、5．46(1 H，d，J= 7．2 Hz，H一1”)、3．17～3．28(4 H，m，H一2”，3”，4”， 5”)、4．O5(1 H，dd，J=12、6．6 Hz，H a一6”)、4．28 (1 H，dd，J=12、2．2 Hz，H b一6”)、6．13(1 H，d， J=15．6 Hz，H-2 )、7．35(1 H，d，J=15．6 Hz，H一 3 )、7．38(2 H，d，J=8．4 Hz，H一5 ，9 )、6．80 (2 H，d，J =8．4 Hz，H一6 ，8 )。 C—NMR (75 MHz，DMSO—d6) ：156．4(C一2)、133．1(C一 3)、177．4(C-14)、161．2(c_5)、98．8(c_16)、164．2 (C_7)、93．7(c )、156．4(C-J9)、103．9(C一10)、 120．8(C一1 )、130．8(C一2 ，6 )、160．0(C一4 )、 l15．1(c一3 ，5 )、101．0(C一1”)、76,2(C一2 )、 74．2(C-3”)、7O．O(C_4 )、74．1(C一5”)、63．0(C一 6”)、166．2(C一1 )、113．7(C—2 )、144．6(C—3 )、 124．9(C-4 )、130．2(C一5 ，9 )、159．8(C一7 )、115．8(c-6 ，8 )。以上数据与文献[4]对照一 致，故确定化合物5为椴苷(kaempferol 31B—D一(6一 O-trans p—coumaroy1)glucopyranoside)。

 化合物6：黄色针状结晶(甲醇)，mp 225．0～ 226．0℃。三氯化铁一铁氰化钾反应阳性，示有酚 羟基存在；盐酸一镁粉反应阳性，推测为黄酮类化 合物。 H-NMR(300 MHz，DMSO—d6)6：6．95 (1 H，s，H一3)、6．37(1 H，d，J=2．1 Hz，H一6)、 6．80(1 H，d，J=2．1 Hz，H-8)、6．96(1 H，d，J= 8．7 Hz，H一5 )、7．6l(2 H，m，H一2 ，6 )、3．9O (3 H，s，7一OCH3)、3．87(3 H，s，3 OCH3)、 l2．96(1 H，s，5一OH)。在NOESY(600 MHz， DMSO· )谱中： 3．87与 6．37、6。80相关； 3．90与 7．6l相关。因此有如下归属： 3．90 (3 H，s，3 OCH3)、3．87(3 H，s，7一OCH3)。 ”C—NMR(150 MHz，DMSO—d6) ：164．0(C一2)、 103．4(C一3)、182．0(C～4)、161．2(C一5)、98．0 (C_16)、165．1(C一7)、92．7(C_8)、157．3(C-9)、 104．7(C—lO)、121．4(C一1 )、110．3(C_2 )、148．1 (C一3 )、150．9(C一4 )、115．8(C一5 )、120．5(C一 6 )、56．0(7，3 OCH，)。确定化合物6为4 ，5一 二羟基一3 ，7一二甲氧基黄酮(4 ，5 dihydroxy一3 ， 7 dimethoxyflavone)。

 化合物7：黄色针状结晶(甲醇)。盐酸喉粉 反应阳性，推测为黄酮类化合物。 H—NMR (300／VInz，DMSO—d6) ：6．86(1 H，s，H一3)、6．50 (1 H，brs，H_16)、6．67(1 H，brs，H-8)、8．01(2 H， d，J=7．8 Hz，H-2 ，6 )、7．11(2 H，d，J=7．8 Hz， H ，5 )、3．90(3 H，s，5-OCH3)、3．85(3 H，s，7一 OCH3)、3．82(3 H，s，4 一OCH )。"C—NMR (75 MHz，DMSO—d6) ：161．8(C一2)、106．8(C一 3)、175．7(C-4)、160．3(C-5)、96．3(C-16)、163．7 (c_7)、93．4(c_8)、159．7(c_9)、108．7(C一10)、 123．1(C一1 )、127．8(C一2 ，6 )、159．2(C一4 )、 114．5(C一3 ，5 )、56．1(5一OCH，)、56．0(7一 OCH3)、55．6(4 OCH3)。其 H-NMR谱数据与 文献[5]对照一致，故确定化合物7为4 ，5，7一三 甲氧基黄酮(4 ，5，7 trimethoxyflavone)。

 化合物8：黄色结晶(甲醇)，mp 175— 177℃。三氯化铁一铁氰化钾反应阳性。示有酚 羟基存在；盐酸一镁粉反应阳性，推测为黄酮类化 合物。 H．NMR(300 MHz，DMSO—d6) ：6．17 (1 H，brs，H_6)、6．40(1 H，brs，H-8)、8．O3(2 H， d，J=8．4 Hz，H_2 ，6 )、6．88(2 H，d，J=8．4 Hz， H_3 ，5 )、l2．60(1 H，brs，s on)、5．45(1 H，d， J=6．9 Hz，H-glc一1)、3．15～3．60(6 H，m，糖上其他氢)。BC．NMR(75／~J．nz，DMSO—d ) ：156．5 (C_2)、133．2(C_3)、177．4(C-4)、161．3(C_5)、 99．O(c-6)、165．0(C-7)、93．8(C一8)、156．2(C一 9)、103．8(C一10)、120．9(C一1 )、133．2(C一2 ， 6 )、160．1(C一4 )、115．2(C一3 ，5 )、101．0 (C—glc一1)、77．6(C—glc一2)、76．5(C—glc一3)、 69．9(C—glc一4)、74．3(C—glc一5)、60．9(C—glc一 6)。其 H—NMR谱数据与文献[6]对照一致，故确 定化合物8为山奈酚一3一O一口一D一葡萄糖苷 (kaempferol-3一O -D·glucoside)。

 化合物9：黄色针状结晶(甲醇)，mp 190— 192℃。盐酸 粉反应阳性，推测为黄酮类化合 物。 H—NMR(300~,lnz，DMSO—d6)6：6．77(1 H， s，H一3)、6．51(1 H，d，J=2．2 Hz，H一6)、6．88 (1 H，d，J=2．2 Hz，H一8)、7．53(1 H，d，J= 2．1 Hz，H-2 )、7．12(1 H，d，J=8．6 Hz，H一5 )、 7．66(1 H，dd，J=2．1、8．6 Hz，H--6 )、3．90(3 H， s，5-OCH3)、3．88(3 H，s，7-OCH3)、3．84(3 H，s， 3 OCH3)、3．83(3 H，s，4 OCH3)。其 H—NIVIR 谱数据与文献[5]对照一致，故确定化合物9为 3 ，4 ，5，7一四甲氧基黄酮(3 ，4 ，5，7-tetramethoxyflavone) 。

 4 结论

 从芫花醋炙品的乙醇提取物中分离了9个化 合物，通过理化性质和NMR谱数据分别鉴定为 芫花素(genkwanin，1)、3L羟基芫花素(3 ．hy—droxy—genkwanin，2)、芹菜素(apigenin，3)、洋芹 素一4 ，7一二甲醚(4 ，7-dimethylapigenin，4)、椴苷 (kaempferol-3．13一D一(6—0一trans-p-coumaroy1)glu— copyranoside，5)、4 ，5一二羟基一3 ，7一二甲氧基 黄酮(4 ，5-dihydroxy 3 ，7-dimethoxyflavone，6)、 4 ，5，7一三甲氧基黄酮(4 ，5，7-trimethoxyflavone， 7)、山奈酚一3一O一』8一D一葡萄糖苷(kaempferol一3． D 一D—glucoside，8)、3 ，4 ，5，7一四甲氧基黄酮 (3 ，4 ，5，7-tetramethoxyflavone，9)。化合物1—9 均为首次从芫花醋炙品中分离得到，化合物7、8 为首次从瑞香属植物中分离得到，化合物9为首 次从芫花中分离得到。