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| 不同炮制法对柚皮苷含量影响的研究 |
骨碎补为水龙骨科植物槲蕨Drynaria Jortunei(Kunze)
J．Sm． 的干燥根茎。其性温、味苦，归肾、肝经。具有补
肾强骨，续伤止痛之功能。用于肾虚腰痛，耳呜耳聋，牙齿
松动，跌扑闪挫，筋骨折伤；外治斑秃，白癜风。骨碎补主
含柚皮苷(naringin)、新北美圣草苷等多种黄酮类成分[1 ]，
其内在质量评价多以柚皮苷为指标，含量测定方法多用
HPLC法 ]。骨碎补的炮制方法研究较多，有砂烫法[3 ]，
微波法Es]、膨化法l6 、盐炙法 和盐烫法l8j等。但这些研究
要么只考虑辅料作为传热介质，未考虑其协同作用；要么操
作繁复。到底哪一种炮制方法好，未见文献对其进行比较研究。因此，有必要对其常见炮制方法进行比较研究，以探索
最佳炮制方法。本实验以骨碎补炮制品和煎出液中柚皮苷含
量为评价指标，对骨碎补5种常见的炮制方法进行了比较研
究，现将研究结果报道如下。
1 材料
1．1 仪器
高效液相色谱仪：1525泵，在线真空脱气机，2487检
测器，HP—A．09．O1工作站(美国Waters公司)；DK一
$22型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)；
AR1140型电子分析天平(感量0．1 mg，奥豪斯国际贸易“上海”有限公司)；FZ102型微型植物粉碎机(天津市泰斯
特仪器有限公司)；G80Q23MSI 一C2(SO)型微波炉(广
东格兰仕集团有限公司)；JZ2OY．1一E一2型迅达旋流燃
气灶(湖南迅达集团有限公司)；膨化机：铸铁，容积
3．o I 。
】I 2 试剂
甲醇(色谱纯，天津科密欧化学试剂有限公司)；其他
试剂均为分析纯；水为双蒸水。
1．3 药物与辅料
骨碎补[三湘中药饮片公司，经本人鉴定为水龙骨科植
物槲蕨Drynaria fortunei(Kunze)J．Sm．的干燥根茎]；柚
皮苷(批号：110722 200806，供含量测定用，中国药品生
物制品检定所)；食盐(雪天牌，湖南省轻工盐业集团有限
责任公司，批号：20080912)。
2 方法与结果
2．1 骨碎补的炮制
2．1．1 砂烫法 取生骨碎补药材切成长1～1．5 cm的段
片，混匀，称取50 g备用。将300 g油砂置锅内，用液化气
加热至210 C时投入生骨碎补段片拌炒3 rain，出锅，筛除
砂，然后置糖衣锅中，加约50 g重1块的卵石1 kg，转动
3 min，取出，筛除灰屑，即得。
2．1．2 微波法 一将生骨碎补段片50 g铺叠成1 cm厚，
置微波炉内，用中火加热2 rain，取出，余同砂烫法“然后
置糖衣锅中，筛除碎屑，即得”操作。
2．1．3 膨化法I6] 将生骨碎补段片50 g置膨化机内，4O
r·min 匀速转动，以适当火力加热至压强2 kg·cm_ ，
保温时间4 min，取出，余同砂烫法“然后置糖衣锅中，
筛除碎屑，即得”操作。
2．1．4 盐炙洪 取生骨碎补段片50 g，加食盐水(食盐
10 g，用50 mL开水溶解)，拌匀闷润8 h后，再同砂烫法
“将300 g油砂置锅内，筛除碎屑，即得”操作。
2．1．5 盐烫法_8 将辅料油砂改为食盐，取生骨碎补段片
50 g同砂烫法“将300 g油砂置锅内，筛除碎屑，即
得”操作。
2．2 供试品溶液的制备
2．2．1 不同炮制品供试品溶液的制备称取不同骨碎补炮
制品粗粉各约0．25 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加甲醇
50．0 mL，精密称定总重量(精确至0．01 g)，加热回流
3 h，取出，放冷，精密称定，并加甲醇补足至原重，摇匀，
滤过，弃除初滤液，取续滤液置50 mL量瓶中，备测。
2．2．2 不同炮制品煎出液供试品溶液的制备取各炮制品
约10 g，精密称定，分别置500 mL烧杯中，加2O倍水，用
不锈钢网将骨碎补压入水中，加盖，武火煮沸，再文火保持
微沸40 rain，滤过，药渣再加15倍水煮沸30 min，滤过，
合并滤液，倾人250 mL量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀即
可，取出1．0 mL置蒸发皿中，水浴上蒸干，残渣加甲醇少
量多次溶解，定容至5．0 mL，备测。
2．3 对照品溶液的制备
精密称取110。C干燥至恒重的柚皮苷对照品5．9 mg，
加甲醇定容至1O mL，摇匀，再精密吸取1 mL置1o mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得59 g·mL 的对照品溶
液。
2．4 色谱条件与系统适用性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱为Hypersil
Cl8柱(250 turn×4．6 mm，5 m)；流动相为甲醇一醋酸一水
(40：3：60)；流速1．0 mI ·min ；柱温：25℃；检测波
长 一283 nITl，理论塔板数按柚皮苷峰计算应>3 000(见图
1)
2．5 线性关系的考察
精密吸取柚皮苷对照品溶液2．5、5、10、15、2O／xL依
次进样，测定峰面积。以柚皮苷质量为横坐标(X)，峰面
积为纵坐标(y)进行线性回归，得回归方程为：y一1．518×
1O X一7．053×10。，r一0．999 6。结果柚皮苷在0．147 5～
1．180 0／xg与峰面积线性关系良好。
2．6 精密度实验
精密吸取线性关系考察的3号对照品溶液10 L，重复
进样6次，测定柚皮苷的吸收峰面积，结果RSD 为
0．352 ，说明该仪器精密度良好。
2．7 稳定性实验
精密吸取盐烫骨碎补供试品溶液1O L于0、4、8、
12、16、2O、24 h进样，测定柚皮苷的吸收峰面积，计算
RSD值为0．753 ，表明供试品溶液在24 h内基本稳定。
2．8 重复性实验
对同一批盐烫骨碎补，按“2．2”项下方法平行制备6
份，精密吸取1O L，依法测定骨碎补中柚皮苷的吸收峰面积，按外标法计算含量，其RSD为1．387 ，实验表明，本方法重复性良好。
2．9 加样回收试验
精密称取9份已知含量(O．65 )的盐烫骨碎补粗粉约0．125 g，精密称定，分别加入0．8 mg·mI (精密称取110 C干燥至恒重的柚皮苷20 mg，加甲醇溶解定容至25．0mI )的柚皮苷对照品溶液0．8、1．0、1．2 mI [与样品中柚皮苷含量的比例约为1： (1～1．2)]各3份，按“2．2．1”项下方法分别提取、定容，再按“2．5”项下方法测定柚皮苷的吸收峰面积，计算回收率，结果见表1。
2．10 样品的含量测定
将供试品溶液和对照品溶液过0．45 m微孔滤膜后，
精密吸取1O I ，分别注入高效液相色谱仪，按“2．5”项
下方法测定柚皮苷峰面积积分值，按外标法计算柚皮苷的百
分含量(按干燥品讣)，结果见表2。
实验表明骨碎补甲醇提取液与水煎出液中柚皮苷含量的
顺序均为：盐烫法>膨化法>砂烫法>盐炙法>微波法，因
此，2种不同方法提取的柚皮苷含量都是盐烫法最高。
3 讨论
柚皮苷为骨碎补中主要有效成分之一，因此，测定其含
量对控制其内在质量意义重大。本实验测得骨碎补中柚皮苷
含量与文献报道一致_c 。本实验评价指标采用同时测定骨
碎补饮片与煎出液中柚皮苷含量，前者是为_r评价不同炮制
方法对饮片中柚皮苷的绝对含量的影响，以防过度炮制使其
含量降低；后者是为了评价柚皮苷的煎出率，这是检验炮制
目的之一(炮制利于煎出有效成分)的较好方法，两者均以
含量高者为佳。
砂烫法由于制备油砂时高温使油脂分解，产生的醛酮类
成分，对环境污染大、对人体危害严重，加之油砂比重大，
药物与之不易拌匀，药物易浮于药物上，使之生熟不匀，易
使药物焦糊；且翻动费力、劳动强度大，对锅子摩擦损耗亦大，故值得改进。
膨化法从炮制品的膨胀效果和有效成分提取率来看，还
是比较好的一种方法，但是该法不利于工业化生产，加之其
压力大，易发生爆炸等危险，故该法不宜推广使用。
微波法膨胀效果差，玄毛不下净，且不易从表面变化观
察、判断火候，药物内部焦糊了，外表尚未变色，加之微波
易使分子结构破坏，成分含量下降 ]，故不宜用此法炮制。
且砂烫法、膨化法、微波法等均没有辅料的协同作用。
盐炙法虽然考虑辅料盐的协同作用，但多了用盐水润的
工序，日．盐水润后再用砂烫，亦有砂烫的弊病，加之盐水润
湿使炮制时间延长，对成分破坏多，其膨胀与去毛效果也不
理想，故该法也不好。
盐烫法改油砂为食盐，既有辅料传热介质的作用，又有
盐制人肾的协同作用，加之盐较砂轻，故有易翻动、与药物
易混匀、药物受热均匀、生熟一致，膨胀、去毛效果好，有
效成分含量高、浸出多等特点。冈此，盐烫法是值得推广的
一种方法.
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