1 仪器与试药

 VarianINOVA_4o0核磁共振波谱仪；HP5973一 MSD质谱仪；美国安捷伦科技公司Agilent 1 100高 效液相色谱仪系列，含四元低压梯度系统、在线脱 气机、自动进样器、柱温箱、阵列二极管检测器 (DAD)及ChemStation B01．03色谱工作站；日本岛 津uV一2401PC紫外一可见光分光光度计，色谱用 硅胶(200～300目)及硅胶G预制板由青岛海洋化 工厂生产。乙腈(色谱纯)、甲醇(色谱纯)、磷酸( 分析纯) ， 水为二次蒸馏水， 其它试剂均为分析 纯。实验样品采自贵州省织金县， 由贵阳医学院龙 庆德老师鉴定为C e r a t o s t ig m a w i l l m o t t i a n u m S t a p f ． 。

 2 方法与结果

 2 ． 1 药材提取与分离

 紫金莲药材粗粉1 ． 5 k g ， 用3 倍量乙醇回流提 取2 次， 每次1 ． 5 h ， 过滤， 滤液减压回收乙醇至 7 5 0 m l ， 加水7 5 0 m l 混匀， 用氯仿萃取3 次， 每次 3 0 0 m l ，合并氯仿， 减压回收氯仿得浸膏1 3 g 。

 2 ． 2 化合物分离

 1 3 g 浸膏用少量丙酮溶解， 加3 0 g 硅胶( 2 0 0 — 3 0 0 目) 拌样， 晾干， 研细， 备用；取硅胶( 2 0 0 3 0 0 目) 3 0 0 g ， 用石油醚( 3 0 6 0 ℃ ) 湿法装柱；将拌样 硅胶上于装好硅胶柱表面，用石油醚( 3 0 6 0 ℃ ) ：醋 酸乙酯( 9 ． 5 ：0 ． 5 ) 洗脱，分段收集；各段在硅胶G 预制板上点样， 用石油醚( 3 0 6 0 0C ) ：醋酸乙酯( 9 ： 1 ) 展开， 检查合并R f = 0 ． 5 的桔黄色主斑点部分， 回收溶剂，残留物用1 0 g 硅胶拌样， 上于2 0 0 g 硅 胶( 2 0 0 3 0 0 目) 柱上，用石油醚( 3 0 6 0 c(= ) ：氯仿( 8 ： 2 ) 洗脱， 分段收集；各段在硅胶G 预制板上点样， 用石油醚( 3 0 6 0 qC ) ： 氯仿( 6 ：4 ) 展开， 检查合并 R f = 0 ． 5 的桔黄色主斑点部分， 回收溶剂， 残留物 用适量氯仿溶解放置结晶， 滤出结晶， 得黄色颗粒 结晶2 ． 5 g 。

 2 ． 3 结构确定

 白花丹醌呈桔黄色针晶；熔点7 8 ． 5 7 9 ． 5 ℃ ； U V h ⋯ ( M e O H ) ：2 0 9 ． 5 、2 6 4 ． 5 、4 1 5 ． 0 n m ；E l — M S m ／z ：1 8 8 ( M ’ ， 1 0 0 ) ， 1 7 3 ， 1 6 0 ， 1 4 5 ， 1 3 1 ， 1 2 0 ， 1 0 3 ；I R ( K B r ) c m ～ ： 1 6 6 4 ， 1 6 4 5 ( C = 0 ) ， 1 6 0 9 ， 1 4 5 5 ( A r ) ， 1 3 6 5 ， 1 2 5 9 ， 1 2 3 1 ， 1 1 6 1 ， 1 0 2 8 ， 9 0 2 ， 8 3 6 ， 7 5 2 ； ‘H — N M R ( C D C l ， ) 8 ：2 ． 2 7 ( 3 H ， d ， J = 0 ． 8 H z ， 2一C H ， ) ， 6 ． 8 0 ( 1 H ， d ， J = 0 ． 8 H z ， 3 一H ) ， 7 ． 2 6 ( 1 H ， d d ， J = 2 ． 0 ， 7 ． 6 H z 6 一H ) ， 7 ． 6 0 ( 2 H ， m ， 7 ， 8 一H ) ；1 3 C — N M R ( C D C l 3 ) ：1 6 ． 5 ( 2 一C H 3 ) ， 1 1 5 ． 0 ( C 一4 a ) 1 1 9 ． 3 ( C 一8 ) ， 1 2 4 ． 1 ( C 一6 ) ， 1 3 2 ． 0 ( C 一8 a ) ， 1 3 5 ． 4 ( C 一3 ) ， 1 3 6 ． 1 ( C 一7 ) ， 1 4 9 ． 6 ( C 一 2 ) ， 1 6 1 ． 1 ( C 一5 ) ， 1 8 4 ． 7 ( C 一1 ) ， 1 9 0 ． 2 ( C 一4 ) 。 以上数据与文献怛’。’ 刊报道的一致， 确定该化合物 为白花丹醌，结构式见图1 。

 2 ． 4 纯度检测

 2 ． 4 ． 1 杂质检查取白花丹醌加甲醇制成1 g ／L 样品溶液，条带状点于硅胶G F ：，。薄层板上， 点样量 1 0 ¨l 、2 0 Ix l ；展开剂：石油醚( 6 0 9 0 ~ C ) ： 乙酸乙酯 ( 9 ： 1 ) ；正己烷：丙酮( 9 ． 5 ：0 ． 5 ) ， 石油醚( 6 0 9 0 ℃ ) ： 氯仿( 8 ： 2 ) ；色谱识别：紫外光( 2 5 4 n m ) 灯下和 1 0 ％ 硫酸乙醇加热后检视；在薄层板上经3 个展开 系统两种显色方式检识均呈单一斑点， 色谱中不显 杂质斑点。

 2 ． 4 ． 2 峰面积归一化法纯度检查H y p e r s i l C 1 8 色谱柱( 2 0 0 m m × 5 ． 0 m m ， 5 ¨m ) 以乙腈为流动相 A ， 0 ． 1 ％ 磷酸为流动相B ，按表1 中的规定进行洗 脱；用D A D 检测器在2 3 0 、2 5 4 、2 7 0 、3 2 9 、3 6 0 n m 测 定，各波长下的峰面积按归一化法计算， 结果白花 丹醌对照品在各波长下测定的含量均大于9 8 ％ ， 结果见表2 、图2 。

 3 讨论

 从紫金莲中提取白花丹醌在回收乙醇过程中， 发现使用低浓度乙醇时，白花丹醌可随溶剂蒸馏出 部分，造成损失，于是在回收到1 ml含2 g生药时 停止回收，加一倍水，用氯仿提取富集白花丹醌进 行下一步分离。在稳定性研究中发现，白花丹醌在 光照高湿条件下稳定，但有升华性，因此白花丹醌 需要密闭低温保存。

 白花丹醌为紫金莲的活性成分，含量较高，性 质稳定，用上述制备方法进行提取 分离、纯化，操作方便，重现性好，制备的白花丹醌符合对照品的 要求，可作为紫金莲及其制剂质量研究时的化学对 照品。