1 建立国际对照品的前提

 WHO在指导原则⋯ 中指出，ICRS的制备、标 定、保存、分发是一项费钱费时的工作，因此在建立 某一种ICRS前，首先应对其研制的必要性进行评 价。一般情况下，当在质量标准中采用一种新的方 法或新研制出一种新的药品或产品时，就需要建立 一种新的化学对照品。目前在药品质量标准中要 求用到对照品的方法有红外分光光度法、紫外分光 光度法、色谱法等定性和定量的方法。

 2 对照品原料的选择

 对照品所需原料可以从常规生产过程中选出 一批符合对照品质量要求的原料，如纯度达不到对照品的要求，可对所选原料作进一步精制。对照品原料纯度的要求是根据对照品的用途而定的，如为 鉴别用对照品，无需很高的纯度，因为少量杂质不 会对测定结果产生明显的影响；而含量测定用对照 品则要求的纯度很高，通常以干燥品或无残留溶剂 计算，纯度应不得少于99．5％。在考虑一种物质是 否适合作为对照品时，首要考虑的是其中的杂质对 非特异性定量法是否有影响，如果杂质的理化特性 与对照品的主成分相近，则在一定的条件下不妨碍 此对照品的使用；相反，如杂质有显著的特异性，即 使痕量，也不能采用。

 2．1 鉴别用对照品的原料选择 用作红外、色谱 分析等鉴别的对照品，如果纯度合适，可以从常规 产品生产过程中选一批质量好的化合物作为对照品原料。必要时，可要求供应单位进行纯化。作为 鉴别用对照品，最重要的是对化合物进行检验，应 至少由一个实验室采用药典或相关标准中的方法 进行全部物理和化学方法检验，但无菌和细菌内毒 素检查等实验可以不做。

 2．2 杂质检查用对照品的原料选择检验中需要 用到的杂质对照品有多种，检验方法不同，对对照品的要求也不同，如薄层色谱法(TLC)，纯度至少 90％ ；液相(LC)或气相(GC)色谱法，纯度则要求 更高，一般要求达到95％；如果仅仅是作为纯度检 查用的化学对照品，则由一个实验室标定就足够 了；如果是首批国际对照品，则须做相应的化学、理 化鉴定试验，如质谱(MS)、核磁共振谱(NMR)和元 素分析等。

 2．3 含量测定用对照品的原料选择 比色法、液 相色谱、气相色谱或紫外分光光度法等所用的含量 测定用对照品，要求至少应由3个实验室采用不同 的已建立并经过验证的方法进行标定(包括药典方 法)。如果测定方法为非特异性含量测定法(如比 色法或UV法)，则必须用相对吸收度或相对反应 率来检查杂质百分比；如果测定方法为选择性的定 量方法，特别是该方法是用来测定杂质含量时，应 尽可能采用多种方法，最好用绝对测定法。对于酸 或碱性的样品，采用酸碱滴定法测定较为简单，也 可采用其他化学计量反应方法来测定；某些情况下 也可用相溶解度法或差示量热扫描法来进行含量 和纯度测定。

 3 国际对照品的测定方法

 确定所选择原料是否可用来制备对照品，首先必须先建立相应的检测方法。检测方法可分为两 类：鉴别方法和测定纯度的方法。对大多数方法而 言，如果测定出杂质含量，就不能以绝对数值表示 此化合物的纯度，实验报告给出的数值是基于不同 实验方法数据得出的近似值。

 3．1 对照品的鉴别方法 当对照品原料的分子结 构已知的情况下，可用红外分光光度法进行鉴别； 但当这种化合物存在多种异构体时，需要采用核磁 共振、质谱、x光衍射等方法进行确证。如测定的 化合物目前还没有建立标准谱图，也没有特征参 数，则需要按确定新化合物的方法来进行鉴别，这 些方法包括元素分析、晶形检查、质谱、核磁共振、 功能团分析、红外、紫外及其他可能的各种分析 方法。

 3．2 对照品的纯度测定方法 纯度测定的方法按 照用途可分为三类，第一类是需用外标对照品的方 法(如色谱法、分光光度法)；第二类是依据固有的 动力学特性建立的方法(相溶解度法或差热扫描 法)；第三类为其他方法。

 用第一类方法测定纯度时必须用系统适应性 试验进行验证，色谱法常用于杂质的鉴别及定量， 其中HPLC法是应用最广泛的色谱方法，常用的方 法还有TLC法、GC法，毛细管电泳法也得到越来越 多的应用。第二类方法为绝对法，用来测定总杂质 的含量。差示量热扫描法正越来越多的用于检测 具有多形结构且构型不同的化合物，同时测定全部 固体杂质的总量。相溶解度法应用较少，可用于共 存物的检测(包括异构体)。第三类其他方法包括 紫外分光光度法、红外分光光度法、核磁共振、滴定 法、比旋法、水分及残留有机挥发物的测定方 法等。

 4 对照品的含量赋值

 对照品的含量是在不同实验室采用不同分析 方法所得结果的基础上确定的，实验数值是对真值 的最佳近似值。通常，对照品的含量需在确定杂质 含量的基础上进一步确证。有时对照品用前须干 燥，这时对照品的含量应以干燥品计算。

 5 对照品的分装

 对照品分装应遵守相应的GMP规定，对不同 分装阶段提出明确要求并进行严格控制，以避免有 产生污染，贴错标签等情况的发生。分装容器应能 防潮、避光、避免样品的氧化，事先应进行水分渗透 性实验和相容性试验研究。从稳定性的角度来看，最佳包装容器为密闭的玻璃安瓿，但安瓿的缺点是 打开时可能会掉入玻璃渣，并难以重新密封。

 对照品的分装规模比较小，生产上的分装设备 并不适用，因此，对照品的包装通常由发放单位负 责，通常是手工分分装的，贵重及装量很少的对照 品必须先制成溶液分装，再冷冻干燥或蒸发干燥。 有些对照品分装时要充入惰性气体或控制湿度，因 此，包装时应使用手套式操作箱或气密柜。吸湿性 强的物质可用一次性小瓶分装。

 6 对照品的贮存

 对照品的贮存条件可根据原料而定，一般来 说，低温保存能保证对照品的稳定性；但如果对照 品不是用安瓶或其他能密闭的容器保存，则含水的 对照品在0 oC 以下贮存会影响其稳定性；冰箱或 阴冷房间的湿度大，对照品亦易吸潮降解。大部分对照品可在5℃保存，放置至室温后再打开，以防 止热胀冷缩吸入水分。

 7 对照品的稳定性监测

 鉴别用对照品如果有某种程度的降解是不会 影响其使用的；供色谱定量用的对照品，即使出现 很少量的杂质都是不允许的。因此建立一种对照品时，应根据其用途和所采用的分析方法的特点， 规定对照品降解的程度。

 对照品研制部门应有一套定期监测规程，根据 需要制定监测频率。可根据对照品的性质和用途 来制订对照品的稳定性监测方法。用于鉴别的对照品，仅需证明其仍能够合适用于相应的鉴别即可，如红外吸收光谱图与建立该对照品时是一致的 即可。如果用于其他用途，则须采用多种快速、灵 敏的方法检查，同时避免消耗大量的库存对照品。 在多数情况下，都应重点检查对照品是否有明显的 吸潮现象，以免引起对照品的水解或含量的下降。 色谱法是最常用的一种方法，也可采用其他适宜方 法，如差示量热扫描法等；一般来说，如果杂质含量 或纯度发生了改变，说明应更换该批次的对照品。 有时对照品褪色或外观起了变化，不管其是否有明 显的降解，此对照品都不能再使用。

 8 对照品的有效期

 对照品不需标明有效期，但对照品发放单位应 建立常规的保障体系，对其发放的对照品采用有效 的监测程序，确保对照品的质量。如果发放单位对 对照品进行换批时，可根据实际情况，允许有一定 的过渡期。

 发放单位应向使用者提供开封后的对照品保 存方法。建议使用者将对照品按照规定要求保存， 并在开瓶后短期内用完，避免打开较长的对照品， 同时，在重复使用过程中应尽量避免对照品的降 解、污染或吸潮。